我們提供各種熒光染料和探針,包括鈣、pH和膜電位指示劑。

細胞內鈣離子的檢測

鈣離子檢測試劑盒采用細胞內鈣離子濃度熒光探針檢測鈣離子濃度水平的變化。

鈣離子濃度變化是活細胞接受外界刺激后產生級聯反應的重要信息傳遞方式,因此細胞內鈣離子檢測是信號轉導G蛋白偶聯受體(GPCR)介導的相關藥物篩選以及其他相關實驗中非常重要的一種研究手段。

F03具有極高的細胞滲透性,經過簡單孵育即可實現細胞加載。穿透細胞膜進入細胞后被細胞內的酯酶剪切形成不易透過細胞膜的F03新產物,從而被滯留在細胞內。F03游離配體幾乎是非熒光性的,其熒光不會隨鈣離子濃度升高而增強。但是,當它與細胞內鈣離子結合后可以產生較強的熒光,熒光會增加60至100倍,最大激發波長為 494nm,最大發射波長為 516nm。實際檢測時推薦使用的激發波長為488nm左右,發射波長為 515~530nm。可以使用熒光顯微鏡、酶標儀、激光共聚焦顯微鏡或流式細胞儀檢測細胞內鈣離子濃度的變化。

BB-48112  Ca2+鈣離子檢測試劑盒


細胞pH檢測

細胞內pH(Intracellular pH,pHi)是酶活性和細胞功能的重要生理決定因素,所有蛋白質都依賴于嚴格調節的pH值以維持其結構和功能。質子 - 去質子化可以指示生物表面的電荷,并且是許多代謝反應中的組成部分。此外,跨線粒體膜的質子梯度用于產生細胞能量并支持其他線粒體過程。因此,細胞已經開發出多種機制來保持pHi的窄范圍,以響應pH值的細胞內和細胞外波動。

貝博TM BBcellProbe? 細胞內pH值檢測試劑盒采用BBcellProbe? P01細胞內pH值熒光探針檢測胞內pH值的變化。BBcellProbeTM P01是pH敏感的熒光染料,其在堿性條件下熒光強更高,反之酸性條件下變低,從而BBcellProbeTM P01可被用于監測細胞內pH變化。

細胞內pH值檢測試劑盒


線粒體膜電位的檢測

貝博? BBcellProbe? 線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是利用JC-1探針檢測線粒體膜電位變化的試劑盒,可以快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化,可以用于早期的細胞凋亡檢測。

本試劑盒染料JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123相比,特異性更高,對線粒體膜電位變化的特異性高于質膜電位變化,對線粒體去極化檢測的檢測一致性更好;紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;檢測靈敏度強,對細胞應激反應的微小異質性都能辨別。

JC-1有單體和聚合體兩種形式,兩者的發射光譜不同。JC-1單體(J-monomer)的最大激發波長為514nm,最大發射波長為529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激發波長為585nm,最大發射波長為590nm。

JC-1可以透過細胞質膜進入細胞,以單體狀態游離于胞質內,正常健康細胞的線粒體的膜電位較高,具有極性,JC-1 依賴于膜電位的極性被迅速攝入線粒體的基質內,并因濃度增高而在線粒體內形成多聚體,多聚體488nm激發時的最大發射波長為590nm,發射光為橙紅色熒光,在流式圖上表現為FL1和FL2雙陽性;當細胞發生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,線粒體膜電位較低,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,從線粒體內釋放到細胞質,此時JC-1為單體,488nm激發時最大發射波長為527nm,可以產生綠色熒光,形成流式圖中細胞FL1為陽性。凋亡細胞則大多為FL1單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。

線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。